Identificación molecular de perfiles enterotoxigénicos de Bacillus cereus en arroz cocido recalentado en restaurantes de Lima, 2005 – 2016

Abstract

Se realizó un estudio transversal, considerando 180 aislamientos presuntivos de Bacillus cereus de muestras de alimentos preparados que contienen arroz cocido en restaurantes públicos de Lima Metropolitana del 2005 al 2016. Se utilizaron métodos de cultivo y bioquímica convencional, de acuerdo a la FDA/BAM y API, técnicas inmunológicas de RPLA y Duopath; Se caracterizaron por PCR los perfiles enterotoxigénicos y de detección de B. cereus (genes gyrB, nheA, nheB, nheC, hblA, hblD, hblC, cytK, bceT, inhA, nprA, hlyII plcR y plcA), La totalidad de aislamientos fueron característicos de B. cereus sensu lato, 96.7% presentaron reacción bioquímica típica y 6.7% presentaron toxinas proteicas en forma de cristales. El 60.0 % fueron positivos de B. cereus sensu stricto por API 50 CHB. 66.7 % fueron positivos para RPLA, 65.6% y 72.8% fueron positivos para HBL y NHE con el Test de flujo lateral Duopath® Cereus. 100 % amplificaron por PCR al menos uno de los sistemas del gen de la girasa B, se observó muy buena concordancia con sistemas convencionales con un valor Kappa de 1.0 (P < 0.000). 91.1% y 93.3% amplificaron por PCR al menos un gen de los complejo HBL (hblA, hblC y hblD), y NHE respectivamente, 95.6%, 94.4%, 85.6%, 83.3% 77.8% y 76.7% amplificaron los genes cyt K, plcA, bceT, plcR, npr e inhA, mientras que el gen hlyII no se expresó. Se determinaron 37 perfiles moleculares con diversidad y gran capacidad de producción enterotoxigénica de B. cereus, lo cual, permitirá definir estrategias de detección molecular del patógeno y sus toxinas en menos tiempo, con mayor especificidad y sensibilidad, considerando los perfiles enterotoxigénicos más frecuentes.