Maestría Facultad de Medicina Veterinaria

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Browsing Maestría Facultad de Medicina Veterinaria by browse.metadata.advisor "Maturrano Hernández, Abelardo Lenin"

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    Caracterización molecular de Pasteurella multocida aislada de alpacas con signos de neumonía
    (Universidad Nacional Mayor de San Marcos, 2016) Rimac Beltrán, Rocío; Maturrano Hernández, Abelardo Lenin
    Caracteriza molecularmente 24 aislados de P. multocida provenientes de alpacas con neumonía, identificados por pruebas bioquímicas y mediante la prueba de PCR a travez de la amplificando del gen kmt1 presente solo en esta especie. Posteriormente se realizó la tipificación capsular mediante la técnica de PCR múltiple obteniéndose que todos los aislados pertenecen al tipo capsular A. La tipificación en base al antígeno LPS, el cual permite la clasificación de P. multocida en 16 serovares agrupados en 8 genotipos, resultó en que los aislados de este estudio pertenecieron al genotipo LPS L6, correspondiente a los serovares 10, 11, 12 y 15. Además, se analizó la presencia de 4 genes codificantes de factores de virulencia (toxA, tbpA, pfhA y hgbB), detectándose en todos los aislados los genes toxA (100%) y tbpA (100%). Para evaluar la diversidad entre los aislados, se emplearon las técnicas BOX-PCR y ERIC-PCR, los cuales fueron analizados por el programa NTSYSpc 2.10 para el desarrollo de los dendogramas mostrando baja diversad entre los aislados de alpaca, corroborado por el agrupamiento de 23/24 aislados en un único cluster.
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    Detección de Escherichia coli productora de Betalactamasas de Espectro Extendido en Primates No Humanos mantenidos en semicautiverio en las Islas Iquitos, Muyuy y Padre Isla, de la Cuenca Amazónica Peruana
    (Universidad Nacional Mayor de San Marcos, 2024) Bazalar Gonzales, Jhonathan Arturo; Maturrano Hernández, Abelardo Lenin
    Detecta Escherichia coli productora de BLEE en PNH mantenidos en semicautiverio en las islas Iquitos, Muyuy y Padre Isla, de la Cuenca Amazónica Peruana, mediante métodos microbiológicos, moleculares y genómicos. En agosto del 2022, se colectaron 69 muestras fecales de Saguinus mystax, Saguinus labiatus y Saimiri boliviensis, mediante muestreo aleatorio estratificado, y se enviaron al Laboratorio de Biología y Genética Molecular de la Facultad de Medicina Veterinaria de la Universidad Nacional Mayor de San Marcos para su análisis. Se identificaron 55 aislados de E. coli en total, mediante agar MacConkey, agar EMB y pruebas bioquímicas, y se evaluaron sus perfiles de resistencia mediante el método de Kirby-Bauer, de acuerdo con los lineamientos del CLSI. Los aislados sospechosos de BLEE se confirmaron mediante el método de Jarlier y se realizó la secuenciación de sus genomas completos, empleando la plataforma MiSeq de Illumina. El 5.45% (3/55) de los aislados expresaron fenotipo BLEE. Todos los aislados productores de BLEE fueron MDR y uno de ellos expresó fenotipo hipermucoviscoso. Además, se identificaron dos variantes del gen blaCTX-M: blaCTX-M-15 y blaCTX-M-55, que codifican CTX-M-15 y CTX-M-55 respectivamente, y dos aislados fueron reconocidos como ST10, un linaje pandémico de alto riesgo. El análisis filogenómico demostró su estrecha relación con cepas humanas y de animales domésticos, resaltando el impacto negativo del hombre y de las actividades antropogénicas en la interfaz humano-animalmedio ambiente. Los resultados confirman que el 4.35% (3/69) de los PNH que habitan en esta región son portadores de E. coli productora de BLEE, y sugieren que podrían actuar como diseminadores en la Amazonía Peruana.
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    Evaluación de la respuesta inmune Th1 y Th2 en cuyes infectados experimentalmente con una cepa aislada de campo de Salmonella Typhimurium
    (Universidad Nacional Mayor de San Marcos, 2018) Mejía Zavala, David Geiner; Maturrano Hernández, Abelardo Lenin
    Evalúa la expresión relativa de las citoquinas involucradas en la respuesta inmune Th1 y Th2 en 21 cuyes (Cavia porcellus) inoculados experimentalmente con una cepa aislada de campo de Salmonella Typhimurium a una dosis de 102 UFC/ml vía intraperitoneal y 7 cuyes inoculados con la misma cepa inactivada (grupo control). Se utilizó animales destetados de 15-30 días de edad, sin importar sexo y clínicamente sanos, todos mantenidos en las mismas condiciones en el bioterio de la Facultad de Medicina Veterinaria de la Universidad Nacional Mayor de San Marcos. Se agruparon los cuyes en 4 pozas (A, B, C y D) y cada poza con 7 animales cada uno, además se colocaron 2 cuyes centinelas no inoculados. La toma de muestras de sangre y tejidos se realizó lo días 1, 3, 5, 7, 9, 15 y 30 postinoculación, siendo colectados 3 individuos del grupo tratamiento y 1 del grupo control. El aislamiento de los leucocitos sanguíneos se realizó por la técnica del gradiente de Ficoll y la extracción del ARN total de éstas células mediante el uso de Trizol. El ADNc fue sintetizado a partir de las muestras de ARN y luego se desarrolló la PCR en tiempo real con “primers” específicos para las citoquinas en estudio. La expresión relativa fue determinada por el método comparativo 2-ΔΔCt a fin de evaluar la expresión de los ARNm de las citoquinas analizadas con respecto al calibrador (cuy sano), usando como gen constitutivo de referencia al GAPDH. Las expresiones de los genes de todas las citoquinas mostraron un aumento con respecto a los calibradores y un incremento con mayor intensidad con respecto a las expresiones de los cuyes del grupo control; además, una cinética ascendente con respecto a los días post-inoculación, los primeros días hubo predominio de las expresiones del perfil Th1, posteriormente ambas aumentan con predominio final de las citoquinas de la respuesta inmune Th2. El análisis histopatológico y el aislamiento se realizó para confirmar la infección y los animales mostraron las lesiones características de salmonelosis, siendo el hígado el órgano afectado con mayor frecuencia.
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    Evaluación in vitro de la actividad inmunogénica de una proteína recombinante de Pasteurella multocida aislada de casos de neumonías en alpacas (Vicugna pacos)
    (Universidad Nacional Mayor de San Marcos, 2017) Maximiliano Guerra, Jorge Enrique; Maturrano Hernández, Abelardo Lenin
    Busca determinar el perfil inmunogénico Th1 y Th2 de una proteína de membrana externa P6-like recombinante de P. multocida aislada de casos neumónicos fatales en alpacas obtenida mediante tecnología recombinante, donde fue seleccionada la proteína in silico, clonada, expresada y purificada, para luego ser enfrentados con PBMC de alpaca en una concentración de 10ηg por cultivo. Estos cultivos fueron colocados a 38°C durante las 3, 6, 9, 12, 18, 24, 48 y 72 horas. Posteriormente se extrajeron el ARNm de cada cultivo y mediante la prueba de RT-PCR en Tiempo Real se observaron los niveles de expresión de citoquinas de perfil Th1 y Th2. Este estudio tiene como objetivo observar el perfil citocínico que estimula la P6-Like recombinante. Esta evaluación in vitro forma parte de la elaboración de una vacuna de última generación para la prevención de neumonías pasteurelósicas en crías de alpacas.
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    Identificación de genes de resistencia bacteriana a antibióticos en restos fecales de cerdos de crianza intensiva a través de la metagenómica funcional
    (Universidad Nacional Mayor de San Marcos, 2023) Marcelo Monge, Geraldine Kimberly; Maturrano Hernández, Abelardo Lenin
    La resistencia a antibióticos es ya un problema actual que concierne tanto la salud humana como la salud en general. Gran parte de estos genes de resistencia se diseminan hacia las regiones urbanas a través de bacterias presentes en la microbiota de animales sometidos a producción intensiva, como la producción de cerdos. Por lo que, en el presente estudio, se analiza aislados de Escherichia coli procedentes de muestras de heces de cerdos sometidos a producción intensiva de granjas localizadas en el departamento de Lima, específicamente de la provincia de Huaral. 87 aislados de E. coli fueron analizados por antibiograma mediante la prueba de Kirby Bauer y mediante PCR para la identificación del gen mcr1. Posteriormente se seleccionaron 17 aislados de E. coli en base a su multirresistencia a diversos antibióticos y a la presencia del gen mcr1, secuenciándose un total de 17 genomas de E. coli. En estos genomas, fueron hallados una gran cantidad y diversidad de genes de resistencia a antibióticos (ARGs), destacándose, además del gen mcr1, relacionado con resistencia a colistina, el gen blaCTX-M-55, el cual confiere resistencia a cefalosporinas de 3ra generación, como la ceftriaxona, un antibiótico ampliamente utilizado en medicina humana. Otros ARGs importantes identificados en este estudio, fue el fosA3, relacionado con resistencia a fosfomicina, diversos genes de la familia qnr, que confieren resistencia a quinolonas, genes de la familia tet, que confieren resistencia a tetraciclinas, de la familia sul, de resistencia a sulfonamidas y una amplia diversidad de genes de resistencia a aminoglucósidos. La información generada resulta de vital importancia como evidencia de la diseminación de genes de gran importancia en salud pública, debiéndose tomar medidas que eviten esta dispersión de bacterias portadoras de estos genes a ambientes urbanos.