Doctorado Facultad de Farmacia y Bioquímica

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Actividad antiinflamatoria e inmunomoduladora del extracto clorofórmico de las hojas de Chuquiraga lessing “Huamanpinta“
(Universidad Nacional Mayor de San Marcos, 2014) Ramírez Roca, Emilio Germán; Bonilla Rivera, Pablo Enrique
Objetivos: Determinar la actividad antioxidante, antiinflamatoria e inmunomoduladora del extracto clorofórmico de las hojas de Chuquiraga lessing “huamanpinta”. Diseño: estudio experimental. Lugar: Facultades de Farmacia y Bioquímica y de Medicina, Universidad Nacional Mayor de San Marcos, Lima-Perú. Material Biológico: ratas Holtzman. Intervenciones: se realizó la identificación y elucidación estructural de metabolitos secundarios y se determinó la actividad antioxidante in vitro por el método del difenilpycrilhidrazyl (DPPH). Se agrupó 42 ratas con pesos de 200 a 250 g, en seis grupos de siete cada uno y se midió la actividad de enzimas antioxidantes como superóxido dismutasa (SOD), catalasa (CAT) y la lipoperoxidación. En la actividad antiinflamatoria se empleó el método del edema subplantar según Winter y el test de granuloma según Sedwick inducido por carragenina; y para la actividad inmunomoduladora el método de velocidad de aclaramiento de la tinta china. Principales resultados: se identificó flavonoides, triterpenos, esteroides, alcaloides, taninos, compuestos fenólicos, lactonas sesquiterpénicas. Con el análisis espectroscópico UV se elucidaron los flavonoides: 5,6,7-trihidroxi-4’-metoxiflavona; 3’,5,6,7-tetrahidroxi-4’-metoxiflava nona; 4’,5,7,8-tetrahidroxiflavona; 5,7,8-trihidroxi-4’-metoxiflavona. La DL50 se ubica por encima de 2000 mg/kg, considerándose el extracto como no tóxico y no Clasificado. La actividad antioxidante in vitro de 86.4% (300 ug/mL) e in vivo aumenta la actividad de las enzimas antioxidantes CAT (2146.8 UI/ ml sangre), SOD (10.12 UI/ml sangre) y reduce la lipoperoxidación como MDA (3.6 umol/ml sangre). La mayor eficiencia antiinflamatoria fue a 300 mg/kg (39.1 %); y la eficiencia Inmunomoduladora de 48.23% (200 mg/kg) respectivamente. Conclusiones: Chuquiraga lessing “huamanpinta” manifiesta actividad antiinflamatoria e inmunomoduladora, que la ubica como una especie nativa muy importante en la línea de los recursos naturales.
Actividad antiinflamatoria, capacidad antioxidante y toxicidad de compuestos fenólicos del extracto hidroalcohólico de hojas de Senecio rufescens D.C.
(Universidad Nacional Mayor de San Marcos, 2023) Aguilar Felices, Enrique Javier; Bonilla Rivera, Pablo Enrique; Enciso Roca, Edwin Carlos
Se busca caracterizar y cuantificar los compuestos fenólicos presentes en el extracto hidroalcohólico de hojas del Senecio rufescens y determinar su capacidad antioxidante, antiinflamatoria y su toxicidad por el método de Artemia salina. Mediante la técnica de UHPLC – MS/MS, fueron identificados nueve flavonoides glicosilados metoxilados, de los cuales, ocho son flavonoles y una isoflavona; y seis ácidos fenólicos, de los cuales, uno es derivado del ácido málico y cinco son derivados del ácido cinámico. Los compuestos fenólicos expresados como fenoles totales, flavonoides y flavonoles, demostraron su capacidad antioxidante frente a los ensayos de DPPH, ABTS y FRAP; y actividad antiinflamatoria con una correlación directa positiva. Asimismo, tuvieron una toxicidad moderada (CL50 = 123,58 μg/mL). Se concluye que, los compuestos fenólicos presentes son flavonoles metoxilados, isoflavona metoxilada y ácidos fenólicos, quienes son los responsables de su capacidad antioxidante, antiinflamatoria y de su toxicidad moderada.
Actividad antitusiva del extracto acuoso liofilizado de flores de Cosmos peucedanifolius Wedd. (Panti panti) en cobayos, investigación toxicológica en ratones
(Universidad Nacional Mayor de San Marcos, 2010) Jahuira Huarcaya, Viviana Rita; Bonilla Rivera, Pablo Enrique; Ráez González, José Ernesto
Identifica los metabolismos secundarios del extracto acuoso liofilizado de las flores de Cosmos peucedanifolius Wedd (panti panti), demuestra la actividad antitusiva, vía oral en Cavia porcellus –cobayos; evalúa toxicidad aguda; subcrónica y análisis histopatológico en órganos del ratón, a fin de determinar su inocuidad. El estudio fitoquímico del extracto acuoso liofilizado de las flores de Cosmos peucedanifolius Wedd se realizó mediante la marcha fitoquímica según O. Lock, 1994, encontrándose metabolitos secundarios como flavonoides, compuestos fenólicos, taninos, alcaloides, saponinas, esteroides, triterpénicos, lactonas sesquiterpénicas, glúcidos, y aminoácidos. Luego, se efectuó la separación de los metabolitos secundarios predominantes en cromatografía de capa fina utilizando diferentes solventes orgánicos y se elucidó las estructuras químicas por espectrofotometría UV-visible, como resultado se determinaron presencia de flavonas. La actividad antitusiva del extracto acuoso liofilizado de Cosmos peucedanifolius Wedd se evaluó a través del método de Ulcelay et al. (1991). Se observó que con dosis de 1000mg/kg produjo una reducción de eventos tusivos 84,6% mayor que la codeína fosfato cuya dosis de 10mg/kg produjo 74,6% de inhibición de toses. Por otro lado, la aplicación de las dosis de 500 y 250mg/kg condujo a inhibiciones de 58.1%, y 50,1% los cuales resultan ser mayores a la aplicación del control negativo (suero fisiológico a 5mL/kg) cuya acción apenas llega a 32.8%. La evaluación de la toxicidad aguda en ratones realizada por el método de la clase toxica aguda 423, a las dosis de 25, 200 y 2000mg/kg, el análisis de leucocitos con coloración Wright y el estudio histopatológico por el método Hematoxilina - Eosina no mostró toxicidad aguda. Finalmente, se evalúo toxicidad subcrónica a las dosis de 250, 500 y 1000mg/kg. con el método dosis repetida 90 días 408 OECD, como resultado no se evidenció alteraciones histopatológicas por lo tanto no presentó toxicidad subcrónica. En conclusión el extracto acuoso liofilizado de las flores de Cosmos peucedanifolius Wedd mostró contenido de flavonas presumiendo sean responsables de la actividad antitusiva, con respecto a la toxicidad aguda y subcrónica no se evidenciaron ni acompañaron signos de algún grado de toxicidad.
Análisis de la irritación ocular aguda del colirio elaborado de las flores de la Cantua buxifolia Juss, ex Lam. por el método HET-CAM
(Universidad Nacional Mayor de San Marcos, 2023) Montánchez Mercado, Enrique Christian; Bonilla Rivera, Pablo Enrique
Determina a qué concentración el colirio elaborado de las flores de la Cantua buxifolia Juss, ex lam, presentará irritación ocular aguda, analizada mediante el método HET-CAM. El estudio utiliza el método de prueba de la membrana corioalantoidea para evaluar la irritación ocular aguda, conocido como HET-CAM, a través del estudio de la Cantua buxifolia Juss, ex Lam., ofreciendo una alternativa para el tratamiento de la conjuntivitis. En los resultados, se demuestra mediante el tamizaje fitoquímico, la presencia de metabolitos siendo de mayor abundancia los flavonoides. En relación a los resultados de los índices de irritación ocular según grupos distribuidos: I, IV, V, VI y IX, fueron No irritantes y los grupos II y III ligeramente irritante. El grupo VII Control Negativo y el grupo VIII Control Positivo. Se concluye que las concentraciones del colirio a 1, 2 y 3 mg/ml en comparación con el colirio de Ciprofloxacina, dio lo siguiente: No irritante y la Ciprofloxacina dio como resultado: Sin irritación y ligera irritación. Teniendo en cuenta que el colirio de esta planta a 4 mg/mL tampoco es irritante. Estos resultados se correlacionaron con la abundancia de flavonoides encontrados durante la evaluación fitoquímica de sus flores.
Composición química, actividad anti-Helicobacter pylori y antioxidante del aceite esencial de Satureja brevicalyx Epling “urqu muña“
(Universidad Nacional Mayor de San Marcos, 2007) Carhuapoma Yance, Mario; Bonilla Rivera, Pablo Enrique
El Helicobater pylori, principal agente causal de la gastritis, condiciona el estrés oxidativo debido a la producción de radicales libres. La Satureja brevicalyx, es usada para tratar problemas gastrointestinales, como la gastritis. El objetivo del presente trabajo fue caracterizar los componentes químicos, la actividad anti-Helicobacter pylori y antioxidante del aceite esencial de Satureja brevicalyx. El aceite esencial reportó un rendimiento (1.80%v/p), rotación óptica (-2 a +4º), densidad (0.9047 g/mL) e índice de refracción (1.475). Mediante CG-SM y CG-FID se elucidó 35 compuestos al 97.1%: monoterpenos oxigenados (74.8%), como componentes mayoritarios la pulegona (27.2%), linalol (20.3%), mentona (11.1%), isomentona (8.3%), cis-isopulegona (2.7%), trans-isopulegona (0.9%), carvacrol (0.6%), timol (0.6%) y α-terpineol (0.5%); hidrocarburos sesquiterpénicos (16%), destacando biciclogermacreno (8.2%), β-cariofileno (6.5%) y bicicloelemeno (0.5%); hidrocarburos monoterpénicos (4.1%), con el p-cimeno (2.0%), limoneno (0.7%) y γ-terpineno (0.6%); y sesquiterpenos oxigenados (1.5%), con el espatulenol (0.8%). Por el método de Artemia salina mostró una bioactividad significativa, con una CL50 de 13.35 μg/mL, y por el método de Dosis Fija, en ratones albinos, presenta una DL50 de 655.26 mg/kg, siendo ligeramente tóxica. Por el método de Difusión de Discos, tiene un efecto antibacteriano frente al H. pylori, con un halo de inhibición de 33.33 % en comparación con la amoxicilina a una concentración de 10 μg/mL; por el método de Difusión en Microplacas, la concentración mínima inhibitoria es de 1.00 μg/mL, y la concentración mínima bactericida de 2.00 μg/mL. Se determinó en 3 modelos la actividad antioxidante a concentraciones de 10, 50 y 100 μg/mL: 1) El aceite inhibió al radical DPPH en 67.76, 75.33 y 86.84%, frente al trolox que inhibió en 80.59, 87.17 y 93.09%; 2) secuestró al radical hidroxilo en 28.95, 51.57 y 76.84%; y 3) inhibió de la peroxidación lipídica en 16.4x10-8, 9.8x10-8 y 8.5x10-8 moles x cm, comparado con el trolox que lo hizo en 14.9x10-8, 8.0x10-8 y 7.5 x10-8 moles x cm, frente a 53.9x10-8 moles x cm para el control negativo. Las estructuras químicas del aceite esencial de la S. brevicalyx justifican su actividad anti-Helicobacter pylori y antioxidante. Palabras Clave: Satureja brevicalyx, gastritis, radicales libres, anti-Helicobacter pylori, antioxidante.
Determinación de metabolitos secundarios, actividad antioxidante in vitro, formulación y elaboración de una crema dermocosmética a partir del extracto hidroalcohólico de Minthostachys mollis (“muña”)
(Universidad Nacional Mayor de San Marcos, 2021) Cano Pérez, Carlos Alfredo; Bonilla Rivera, Pablo Enrique
El objetivo de la tesis fue reconocer algunos tipos de metabolitos secundarios en el extracto hidroalcohólico de hojas de Minthostachys mollis (muña) mediante técnicas espectrofotométricas y preparar una forma dermocosmética (crema) determinando su capacidad antioxidante en ambos casos. La muestra vegetal fue colectada en el caserío de Huamanguilla (3276 msnm), Huanta, Ayacucho. El extracto se preparó con hojas pulverizadas de Minthostachys mollis (muña), mediante maceración hidroalcohólica, se realizó la marcha de solubilidad con solventes de diferente polaridad, también la marcha fitoquimica, luego se separaron algunos metabolitos secundarios por cromatografía en capa fina obteniéndose 12 fracciones las que fueron leídas al espectrofotómetro UV-vis.Mediante espectroscopia UV visible, se propone la estructura química de cinco flavonas y una flavanona. En el extracto hidroalcohólico se encontró buena capacidad antioxidante mediante los métodos DPPH y ABTS. Por el método DPPH el valor de la capacidad antioxidante del extracto de muña equivalente a Trolox (CAEET) fue 13,071 mg muestra/mg Trolox y el valor de la capacidad antioxidante del extracto de muña equivalente a Vitamina C (CAEEVC) fue 13,046 mg muestra /mg Vitamina C, respectivamente. Por el método ABTS el valor de la capacidad antioxidante del extracto de muña equivalente a Trolox (CAEET) fue 2,186 mg muestra/mg Trolox y el valor de la capacidad antioxidante del extracto de muña equivalente a Vitamina C (CAEEVC) fue 2,449 mg muestra /mg Vitamina C, respectivamente. La capacidad antioxidante equivalente a Trolox TEAC de las pre-formulaciones dermocosméticas (PF1, PF2, PF3 y PF4) fueron 3315,000; 1506,500; 827,769 y 743.406 mg /g muestra respectivamente (p < 0.05). Siendo PF4 al 1% la que presentó mayor actividad antioxidante.
Efecto analgésico y antiinflamatorio de la administración de Desmodium molliculum (manayupa) en el tratamiento de dismenorreas primarias
(Universidad Nacional Mayor de San Marcos, 2022) Gordillo Rocha, Gloria Clotilde; Bonilla Rivera, Pablo Enrique
Demuestra la acción antiinflamatoria y analgésica de la infusión de las hojas de Desmodium molliculum (manayupa) sobre la Dismenorrea Primaria (DP), determinando para ello si la infusión de las hojas modifica los niveles de: ciclooxigenasa 2, interleucina 6, TNF y pentatrexina 3 y estimando la disminución del dolor. Se realizaron los estudios pertinentes con la finalidad de probar las propiedades mencionadas, encontrándose que esta especie nativa es rica en metabolitos secundarios como flavonoides, saponinas, cumarinas y esteroides. También se evaluó su efecto analgésico y antiinflamatorio en el tratamiento de DP en mujeres de 18 a 45 años al administrarse bajo la forma de infusión (extracto acuoso), previa firma del consentimiento informado. Setenta mujeres con DP participaron en las tres tomas de manayupa más AINES por noventa días (grupo A1) y las cuarenta restantes que toleraban el dolor según la EAV (Escala analógica visual) sirvieron como grupo control (A 2). Al Grupo A1 se les entregó bolsitas filtrantes de manayupa (1.5 g,) para ser bebidas en infusión dos veces al día durante cinco días: 3 días antes y 2 días durante la menstruación. El Grupo A2 consumió AINES. A todas las participantes se les determinó en ayunas: los niveles plasmáticos: de pentatrexina 3, TNF alfa, ciclooxigenasa 2, interleucina 6, perfil lipídico, transaminasas, úrea, creatinina, hemoglobina, hematócrito, VSG: antes del tratamiento (Basal), a los treinta y noventa días. La administración de la infusión de manayupa redujo las concentraciones de la etapa inicial frente a los obtenidos a los noventa días con una media de: ciclooxigenasa 2: 23.36 - 10.37, interleucina 6: 58.90 - 26.85 TNF: 70.91 - 21.73, pentatrexina 3: 68.88–35.13, advirtiéndose una diferencia estadísticamente significativa. En conclusión, la infusión de hojas: Desmodium molliculum administrada a mujeres con DP tiene efecto analgésico y antiinflamatorio como protector beneficioso sobre el control del dolor.
Embriotoxicidad de 35 extractos etanólicos de plantas medicinales del distrito de Cotaparaco, provincia de Recuay – Ancash
(Universidad Nacional Mayor de San Marcos, 2017) Alvarado Chávez, Britt; Bonilla Rivera, Pablo Enrique
Determina la embriotoxicidad de 35 extractos etanólicos de plantas medicinales del distrito de Cotaparaco, provincia de Recuay - Ancash. Desarrolla una investigación Experimental en el Laboratorio de la Facultad de Ciencias biológicas de la Universidad Nacional Mayor de San Marcos. Utiliza una muestra de 35 extractos etanólicos de plantas medicinales y huevos fecundados de Tetrapygus niger (Erizo de mar). Se evaluaron dos concentraciones de 166 y 333 µg/mL de extractos etanólicos. En la evaluación embriotóxica en huevos fértiles de erizo de mar se realizó el análisis sobre los desarrollos embrionarios, la embriotoxicidad y se estableció la similitud y diferenciación de cada uno de los 35 extractos por triplicado de cada especie sobre los huevos fértiles del erizo de mar, tratados a dos concentraciones de 166 µg/mL y 333 µg/mL. En cuanto al desarrollo embrionario de las 35 plantas medicinales, 22 de los extractos etanólicos en las dos concentraciones de 166 µg/m y 333 µg/mL tuvieron un buen desarrollo embrionario. En la embriotoxicidad de los 35 extractos etanólicos, sólo 9 de ellos presentan embriotoxicidad en ambas concentraciones. Se logró establecer similitudes y diferenciaciones de los 35 extractos etanólicos en cuanto a su desarrollo embrionario y embriotoxicidad.
Identificación de los alcaloides de Croton baillonianus (Aubl) por cromatografía líquida de alta resolución y espectrofotometría de masas; análisis de la propiedad citotóxica y antibacteriana
(Universidad Nacional Mayor de San Marcos, 2018) Fuertes Ruitón, César Máximo; Bonilla Rivera, Pablo Enrique
Determina la presencia de alcaloides y flavonoides, así como caracterizar sus correspondientes estructuras; la extracción se lleva a cabo por el método de maceración en metanol, a partir de las hojas en polvo. El aislamiento es monitoreado mediante cromatografía en capa delgada de silicagel 60, paro lo cual el extracto metanólico se fracciona en una columna cromatografica de exclusión en Sephadex LH-20. La purificación de los alcaloides y flavonoides se realiza por cromatografía líquida de alta performance (HPLC).

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