Detección de β-lactamasas de espectro extendido (BLEE) en Escherichia coli y Klebsiella spp. aislados de perros

Abstract

La resistencia antimicrobiana se ha convertido en un problema de preocupación mundial debido al surgimiento y diseminación de patógenos multirresistentes (MDR), como las enterobacterias productoras de betalactamasas de espectro extendido (BLEE), bacterias resistentes a las cefalosporinas de espectro extendido y monobactámicos. Debido al estrecho contacto entre propietarios y mascotas durante los últimos años, los animales de compañía representan potenciales fuentes de transmisión de estos patógenos. El objetivo de esta investigación es detectar fenotípica y genotípicamente betalactamasas de espectro extendido en aislados de Escherichia coli y Klebsiella spp. provenientes de muestras de perros en Lima-Perú. Las cepas aisladas para la detección de BLEE fueron 27 E. coli y 14 Klebsiella spp. Para la detección fenotípica se usó el método americano propuesto por la Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI), método de difusión de disco, usando discos de ceftazidima, cefotaxima, ceftazidima + ácido clavulánico (CAZ/CLA 30/10 μg) y cefotaxima + ácido clavulánico (CTX/CLA 30/10 μg), incubadas a 37° C durante 24 horas. Considerando positivas a aquellas cuyo halo de inhibición sea mayor o igual a 5 mm entre CTX frente a CTX/CLA y/o CAZ frente a CAZ/CLA. Para la detección genotípica, previamente se realizó la extracción de ADN según las instrucciones del fabricante del Kit GenJet (ThermoFisher), posteriormente se realizó un PCR para amplificar los genes bla CTX-M (585 pb), blaSHV (854 pb) y blaTEM (859 pb), los productos fueron examinados mediante un transiluminador de luz azul. Fenotípicamente se encontró una frecuencia de 12% (5/41) de E. coli y 10% (4/41) de Klebsiella spp. productoras de BLEE. La frecuencia de los genes bla en los aislados de E. coli fueron de 41% para blaCTX-M, 26% para blaTEM y 7% para blaSHV y la frecuencia de los genes bla en los aislados de Klebsiella spp. fueron de 43%, 36% y 57% respectivamente. Estos resultados nos demuestran la presencia de enterobacterias productoras de BLEE en animales de compañía, poniéndolos como riesgo potencial de transmisión y reservorios de las mismas.