Efecto de la suplementación de Melatonina y Resveratrol en el medio de criopreservación de espermatozoides epididimarios de alpaca Vicugna pacos (Linnaeus, 1758)

Abstract

La criopreservación de espermatozoides es una tecnología empleada actualmente para la preservación de estas células, no obstante, esta conlleva una serie de efectos negativos que afectan la calidad espermática. Siendo el estrés oxidativo la principal causa, por lo que el objetivo de este proyecto fue evaluar el efecto antioxidante de la Melatonina y el Resveratrol sobre la calidad de los espermatozoides epididimarios de alpacas luego de congelación. Se emplearon muestras espermáticas de alpacas sacrificadas del camal de Huancavelica 24 horas post-mortem, para ser procesadas en el Laboratorio de Fisiología de la Reproducción de la Facultad de Ciencias Biológicas de la UNMSM en Lima, Perú. Se realizaron disecciones de las colas de los epidídimos y se recuperaron las muestras espermáticas. Luego, se evaluaron los parámetros espermáticos de concentración, movilidad, viabilidad, test HOST, fragmentación del ADN y actividad mitocondrial antes y después del congelamiento. En la primera fase (n=15) se realizó la evaluación de la citotoxicidad de Melatonina en refrigeración (4 °C) denominado enfriamiento o “cooling” empleando las concentraciones de 0, 1, 10 y 100 mM, con estos resultados se procedió a la segunda fase (n=30) de congelación (-196 °C) donde se evaluó también control negativo (Medio Yolk), control antioxidante (Maca (20 mg/ml)) y Resveratrol (50 µM). La concentración seleccionada de Melatonina de la primera fase fue de 10 mM, debido a que obtuvo los mejores parámetros post enfriamiento, demostrando el poder antioxidante de esta molécula. Tras el congelamiento, los parámetros espermáticos fueron afectados significativamente, sin embargo, la adición de los antioxidantes redujo el impacto negativo. La Maca (20 mg/mL) y Resveratrol (50 µM) presentaron los mejores rendimientos, destacándose en la movilidad y la integridad del ADN, respectivamente. Por otro lado, la Melatonina (10 mM) si bien no tuvo un impacto negativo no fue significativamente mejor que el control negativo (Medio Yolk). Se concluye que la adición de estos antioxidantes resultó ventajosa, destacándose Resveratrol (50 µM) y la Maca (20 mg/mL).