Desarrollo y validación de una metodología analítica para la cuantificación de aminoácidos en el pez Anisotremus scapularis Chita

Abstract

La investigación tuvo como objetivo desarrollar y validar un método analítico para la cuantificación de quince aminoácidos en músculo liofilizado del pez Anisotremus scapularis (“chita”) mediante cromatografía líquida de alta resolución (HPLC), empleando el reactivo 6-aminoquinolil-N-hidroxisuccinimidil carbamato (AQC) para la derivatización precolumna. Se utilizó un diseño de superficie de respuesta Box–Behnken para optimizar las condiciones de hidrólisis, determinándose como valores óptimos una concentración de ácido clorhídrico de 6 M, un tiempo de 24 horas y una temperatura de 100 °C. La validación del método se realizó conforme a la directriz peruana INACAL DA-acr-20D:201, evaluándose parámetros como rango de trabajo (5–100 μM), linealidad (R² > 0,999), veracidad (sesgo ≤ 15%), recuperaciones entre 97,08 % y 102,44 %, así como precisión en términos de repetibilidad y precisión intermedia. Los límites de detección y cuantificación oscilaron entre 0,002–0,014 g/100 g y 0,005–0,043 g/100 g, respectivamente, evidenciándose además adecuada selectividad, estabilidad de las muestras derivatizadas hasta siete días, sensibilidad del método ante variaciones de los factores evaluados y valores de incertidumbre expandida relativa menores al 20 % para todos los aminoácidos. El método validado cumplió con la mayoría de los criterios de aceptación establecidos por organismos internacionales como la AEFI, AOAC Internacional, FDA, Codex Alimentarius e ICH, constituyéndose en una alternativa confiable y eficaz para la cuantificación de aminoácidos en músculo liofilizado de chita.