EP Genética y Biotecnología

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    Diseño y evaluación in silico de un modelo de bacterioterapia basada en Salmonella entérica atenuada como acarreador de fucoidan de algas pardas
    (Universidad Nacional Mayor de San Marcos, 2022) Magaño Bocanegra, Kevin Jorge; Colona Vallejos, Erasmo Honorio
    El adenocarcinoma ductal pancreático (ACDP) constituye el 90% de los casos de cáncer de páncreas y se sitúa como la cuarta causa principal de muerte relacionada a cáncer. Este se caracteriza por su agresividad, resistencia, rápida progresión y notable desmoplasia que impide la correcta perfusión de drogas, radiación y células inmunitarias. El objetivo del presente trabajo fue diseñar y evaluar un modelo de bacterioterapia basada en Salmonella enterica atenuada como acarreador de fucoidan de algas pardas. La elaboración del modelo teórico planteado se realizó a partir de la revisión bibliográfica de diversas bases de datos, mientras que para la evaluación in silico se hizo uso de herramientas bioinformáticas. El modelo consistió en la expresión de la proteína quimérica ShdA-FLAG-Avidina sobre la superficie de Salmonella Typhimurium χ8768en adheridos a liposomas biotinilados cargados con fucoidan. El modelamiento y optimización de la quimera mostró una aproximación de su estructura global compuesta por el dominio ȕ- barril, el dominio enlazante, el péptido FLAG y la avidina, presentando una óptima calidad estereoquímica. Además, la simulación de inserción de la quimera mostró una profunda penetración en la membrana externa de Salmonella. En conclusión, el modelo de la proteína quimérica-fucoidan constituye una novedosa opción prometedora de bajo costo para el tratamiento del ACDP.
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    Efecto inmunoestimulantes de una dieta suplementada con paredes celulares de una cepa nativa de Saccharomyces cerevisiae, en juveniles de Oncorhynchus mykiss (trucha arcoíris)
    (Universidad Nacional Mayor de San Marcos, 2014) Aguilar Luis, Miguel Angel; Colona Vallejos, Erasmo Honorio
    Señala que la acuicultura es el sector productivo de la alimentación que crece más rápidamente en el mundo. En Peru, la Oncorhynchus mykiss (trucha arcoíris) es una de las especies comerciales más explotadas y el principal problema en su crianza es la susceptibilidad que presentan los estadios juveniles a enfermedades propias de animales en cautiverio. Por ello, hay un creciente interés en el manejo de las dietas de los peces con productos de origen natural para mejorar su inmunidad, aumentar su supervivencia e incrementar la producción. El objetivo fue determinar el efecto inmunoestimulante de las paredes celulares de Saccharomyces cerevisiae nativa, como suplemento dietario en juveniles de Oncorhynchus mykiss (trucha arcoíris). Se suplementó el alimento comercial con paredes celulares obtenidas mediante choque térmico (WC1) y autolisis (WC2). Después de dos semanas de aclimatación, dos grupos de truchas (n=25) fueron alimentadas con las dietas experimentales WC1 y WC2, mientras que el grupo control (n=25) fue alimentado con pienso comercial. Luego de diez semanas de alimentación, se analizó la actividad de la lisozima, la actividad hemolítica del complemento, la capacidad fagocítica y la explosión respiratoria en leucocitos de riñón anterior. Las dietas suplementadas con paredes celulares de levadura nativa WC1 y WC2 incrementaron significativamente los parámetros de la respuesta inmune innata de los grupos experimentales respecto al grupo control (p<0.05). Entre las dietas WC1 y WC2 no se encontraron diferencias significativas (p>0.05). Se concluye que las paredes celulares de Saccharomyces cerevisiae nativa incorporadas en la dieta de truchas juveniles mejoran sustancialmente la inmunidad innata.
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    Evaluación del efecto citotóxico de las fracciones cromatográficas del extracto clorofórmico del bulbo de Dracontium spruceanum (zhu,1996) sobre células madre cancerosas provenientes de la línea celular de adenocarcinoma gástrico AGS
    (Universidad Nacional Mayor de San Marcos, 2023) Alvarez Vega, Hector Santiago; Colona Vallejos, Erasmo Honorio
    El cáncer gástrico es diagnosticado tardíamente o se presenta recurrencia dentro de los 5 años postcirugía. Las recidivas y metástasis tienen como uno de los principales responsables a las células madre cancerosas (CSC). Por lo tanto, el objetivo del fue evaluar el efecto citotóxico de las fracciones cromatográficas del extracto clorofórmico del bulbo de Dracontium spruceanum (eDSBCl) sobre CSC de la línea celular de adenocarcinoma gástrico AGS. Se obtuvieron 11 fracciones por cromatografía en columna y se realizó una evaluación preliminar de la citotoxicidad mediante la técnica de bromuro de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-ilo)-2,5-difeniltetrazol (MTT) de las cuales se escogieron las fracciones cromatográficas F50 y F52 para hallar la respectiva concentración Inhibitoria del 50 % del crecimiento celular (IC50). Las IC50 de F50 y F52 en las CSC de AGS fue de 25.96 ± 3.0 μg/mL y 33.54 ± 8.8 μg/mL a las 24h de exposición, respectivamente. En conclusión, las fracciones cromatográficas F50 y F52 del extracto clorofórmico del bulbo de Dracontium spruceanum presentan efecto citotóxico sobre las células madre cancerosas aisladas de la línea celular AGS. Es necesario realizar más estudios que permitan dilucidar las estructuras químicas de los compuestos presentes en las fracciones cromatográficas.
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    Evaluación in vitro de la capacidad inductora de apoptosis y quimiosensibilizante del péptido permeable Bax BH3 en líneas celulares de neoplasias hematopoyéticas
    (Universidad Nacional Mayor de San Marcos, 2023) Magaño Bocanegra, Kevin Jorge; Colona Vallejos, Erasmo Honorio; Luria Pérez, Rosendo
    Evalúa la capacidad de péptido permeable derivado del dominio BH3 de la proteína Bax (AntBax) de quimiosensibilizar las líneas celulares de neoplásias hematopoyéticas Ramos (linfoma de Burkitt) y RS4-11 (leucemia linfoblástica aguda) empleando la prueba de viabilidad celular por MTT y los ensayos de apoptosis Caspasa 3 activa y TUNEL por citometría de flujo. Las neoplasias hematopoyéticas, como las leucemias y los linfomas, son la causa de aproximadamente 1.2 millones de nuevos casos de cáncer en el mundo, representando el 10% de todos los diagnósticos y siendo los más comunes en niños y jóvenes adultos. A pesar de que las tasas de supervivencia han mejorado, una población de entre el 10 y el 20% de pacientes desarrollan enfermedad refractaria careciendo de un tratamiento óptimamente definido, lo que reduce drásticamente sus posibilidades de curación. En la mayoría de los casos, las recidivas se deben al desarrollo de resistencia y, usualmente en este grupo de cánceres, esta es inducida por la sobreexpresión de proteínas antiapoptóticas de la familia Bcl-2. Se demostró que AntBax promueve la muerte celular por apoptosis en ambas líneas celulares, además de promover su quimiosensibilización al tratamiento con cisplatino. Adicionalmente, encontramos que estos efectos no ocurren en células normales de pacientes sanos. En conclusión, los hallazgos realizados en el presente estudio sugieren que el uso del péptido AntBax es una opción atractiva para el tratamiento alternativo de pacientes con neoplásias hematopoyéticas recidivantes o refractarias.