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Análisis citogenético molecular de poblaciones de Physalis peruviana cultivadas y silvestre de los departamentos de Ayacucho y Cajamarca: Un mapeo físico mediante FISH del ADNr 5s y 45s
(Universidad Nacional Mayor de San Marcos, 2022) Garcia Paitan, Marlon Yuri; López Sotomayor, Alberto Ernesto
Physalis peruviana “aguaymanto”, es una planta nativa de los andes peruano perteneciente a la familia Solanaceae. Actualmente presenta un creciente interés por parte de los agricultores del Perú debido al aumento en la demanda internacional, lo cual también ha despertado interés por parte del estado. Este fitorecurso posee pocos estudios de diversidad genética en el país, por tal motivo es necesario la caracterización genética entre distintas poblaciones cultivadas y silvestres. Uno de los enfoques utilizados para este fin es el citogenético, siendo las técnicas de Hibridación Fluorescente in situ (FISH) las que tienen mayor resolución que las técnicas de tinción clásica. Esta técnica citomolecular usa sondas de ADN ribosomal (ADNr) 5s y 45s para caracterizar poblaciones mediante su mapeo en los cromosomas evaluando su número de señales y posición. De acuerdo a lo anterior, en este trabajo se realizó un análisis citogenético molecular utilizando FISH con ADNr 5s y 45s para investigar poblaciones cultivadas y silvestres de aguaymanto de los departamentos de Ayacucho y Cajamarca. Se observó un predominio de 6 sitios ADNr 5s en todas las poblaciones y para el ADNr 45s, un número de 2 y 4 sitios para las poblaciones cultivadas y silvestre respectivamente, en ambos ADNr se observó una ligera variación intrapoblacional. Del análisis de los cromosomas que presentaban ADNr 5s y 45s, se logró caracterizar 9 tipos de cromosomas en base a su morfología, posición del ADNr y conservación en las poblaciones de aguaymanto. Estas fueron el N1, N2, y N3 que se conservaban en todas las poblaciones; los S1, S2 y S3 en las poblaciones silvestres; C1 y C2 en las poblaciones cultivadas; y CC solo en la población cultivada en Cajamarca. Adicionalmente se encontró una pequeña variabilidad interpoblacional de un mismo tipo de cromosoma con respecto a sus datos morfométricos y de intensidad de fluorescencia. La caracterización citomolecular mostró una marcada diferencia entre las poblaciones silvestres y cultivadas, con variaciones intrapoblacionales en cada una de ellas.
Evaluación de los niveles plasmáticos de IgG y su relación con IFN-γ, IL-4 e IL-2 en individuos vacunados contra SARS-CoV-2, y análisis de la expresión transcripcional de CXCL10 en leucocitos de sangre entera estimulados ex vivo con péptidos de dos variantes virales
(Universidad Nacional Mayor de San Marcos, 2026) Garcia Paitan, Marlon Yuri; Alzamora Gonzales, Libertad
En la etapa post-pandemia, es crucial evaluar los niveles de protección frente al SARSCoV-2 para ajustar programas de vacunación y políticas de control, especialmente en contextos donde la administración de dosis de refuerzo ha disminuido y los estudios sobre inmunidad son limitados. Para ello, es necesario contar con correlatos que incluyan tanto la inmunidad humoral como celular, junto con mediciones de citocinas clave. En el presente estudio se evaluó la relación de los niveles plasmáticos de IgG anti-Spike del SARS-CoV- 2 con las concentraciones de IFN-γ, IL-4 e IL-2 en individuos vacunados, y su asociación con la expresión transcripcional de CXCL10 en leucocitos en sangre entera estimulados ex vivo con péptidos de dos cepas SARS-CoV-2. Se extrajo sangre de 40 voluntarios peruanos, determinando los niveles de IgG anti-Spike del SARS-CoV-2 mediante ELISA semicuantitativo y las concentraciones de IFN-γ, IL-2 e IL-4 mediante análisis multiplexado. Además, se evaluó la expresión de CXCL10 en muestras de sangre estimuladas con péptidos de la proteína Spike del virus original Wuhan y la variante Ómicron mediante RTqPCR. Todos los participantes presentaron IgG anti-Spike en plasma, observándose niveles más altos en varones, en aquellos vacunados en los últimos seis meses, en quienes contaban con más de cuatro dosis y en los vacunados con ARNm-1273. Además, los niveles de estas IgG se correlacionaron positivamente con la edad y negativamente con el tiempo desde la última dosis. La mayoría mostró una respuesta positiva frente a los péptidos de Wuhan y Ómicron, siendo mayor en varones y con una mayor expresión de CXCL10 para Ómicron. No se encontraron correlaciones significativas entre los niveles de IgG anti-Spike, las concentraciones de IFN-γ, IL-2 e IL-4 ni con los valores de −ΔΔCt para Wuhan y Ómicron. Sin embargo, las concentraciones de IFN-γ, IL-2 e IL-4 mostraron correlación positiva entre sí, así como entre los valores de −ΔΔCt para ambas Wuhan y Ómicron. Los modelos de regresión lineal multivariada indicaron que IL-2 influye positivamente, mientras que IL-4 tiene un efecto negativo sobre los niveles de IgG antiSpike. En conclusión, aunque no se evidenció una relación de IgG anti-Spike con las citocinas, ni con la respuesta celular frente a péptidos del virus, los modelos de regresión sugieren una influencia significativa de IL-2 e IL-4 sobre los niveles de IgG anti-Spike postvacunación. Además, la población en estudio mostró un estado inmunitario tanto celular como humoral óptimo frente al SARS-CoV-2, demostrado por el aumento de expresión de CXCL10 en respuesta a la estimulación celular frente a péptidos del virus y a la presencia plasmática de IgG anti-Spike.